在生物樣本儲(chǔ)存、醫(yī)療科研等對(duì)潔凈度要求嚴(yán)苛的場(chǎng)景中,,新買液氮罐的清洗是確保樣本安全的關(guān)鍵前置步驟,。即使廠家已進(jìn)行初步清潔,仍需根據(jù)使用場(chǎng)景決定是否深度清洗,,具體操作規(guī)范如下:
- 生物樣本儲(chǔ)存(胚胎
/ 細(xì)胞):生產(chǎn)過程中可能殘留油漬、金屬碎屑,,污染物可能引發(fā)樣本細(xì)胞膜損傷,。
- 醫(yī)療臨床用途(干細(xì)胞移植):運(yùn)輸過程中易附著灰塵顆粒,微生物污染會(huì)導(dǎo)致樣本活性下降,。
- 高純液氮儲(chǔ)存(半導(dǎo)體行業(yè)):加工時(shí)可能殘留潤(rùn)滑劑,,雜質(zhì)會(huì)影響液氮純度(達(dá)
ppm 級(jí)要求)。
- 普通工業(yè)用途(如金屬冷處理):目視檢查無明顯污漬后,,用干燥氮?dú)獯祾邇?nèi)壁去除浮塵即可,。
- 短期臨時(shí)存儲(chǔ)(<72
小時(shí)):重點(diǎn)用 75% 酒精擦拭頸管內(nèi)壁等接觸樣本區(qū)域。
- 檢查罐體編號(hào)與合格證是否一致,,確認(rèn)真空度檢測(cè)報(bào)告(合格真空度應(yīng)≤10^-3Pa),目視內(nèi)壁是否有明顯油污,、焊渣等雜質(zhì)(直徑>0.5mm
的顆粒需清除),。
- 準(zhǔn)備工具:注射用水(WFI
級(jí))或 0.1% 氫氧化鈉溶液(去油脂)、軟毛尼龍刷(避免劃傷內(nèi)膽),、蠕動(dòng)泵(控制流量 50-100mL/min),,以及塵埃粒子計(jì)數(shù)器,、ATP
熒光檢測(cè)儀等檢測(cè)設(shè)備。
注入
37℃溫注射用水(液面達(dá)罐體 1/3),,用蠕動(dòng)泵循環(huán)沖洗內(nèi)壁,,重點(diǎn)沖刷頸管螺紋處(易殘留加工潤(rùn)滑劑),排水后用白色綢布擦拭,,直至無可見污染物,。
- 生物樣本罐:配置
0.1% 磷酸緩沖鹽溶液(PBS),循環(huán)泵打循環(huán) 30 分鐘,,中和殘留堿性物質(zhì),。
- 工業(yè)罐:用
5% 碳酸氫鈉溶液浸泡 2 小時(shí),去除焊接殘留的助焊劑(溫度控制 25±2℃),。
用三級(jí)過濾純化水(電導(dǎo)率≤1.3μS/cm)進(jìn)行
3 次脈沖式?jīng)_洗(每次注水 - 排空間隔 10 分鐘),,最后用無菌氮?dú)猓饵c(diǎn)≤-40℃)吹掃內(nèi)壁,直至濕度<5% RH,。
- 滅菌處理
- 可拆卸部件(如樣本架,、頸塞)用
121℃高壓滅菌 15 分鐘;整罐用過氧化氫氣體滅菌(濃度 600ppm,,作用 2 小時(shí)),,避免甲醛熏蒸殘留風(fēng)險(xiǎn)。
- 潔凈度檢測(cè)
- 塵埃粒子:每立方米≥0.5μm
的粒子數(shù)≤10000 個(gè)(ISO 8 級(jí)潔凈度),。
- 微生物殘留:ATP
熒光值<100RLU,,相當(dāng)于每平方厘米菌落數(shù)<5CFU。
- 不可使用鋼絲球
/ 金屬刷,,以免劃傷內(nèi)壁(深度>50μm 的劃痕易滋生微生物)。
- 嚴(yán)禁高溫烘干(超過
50℃會(huì)破壞真空層吸附劑,,影響絕熱性能),。
- 75%
酒精僅可用于頸管外壁消毒,不可直接沖洗內(nèi)壁(避免殘留醇類物質(zhì)影響樣本),。
- 內(nèi)壁未干燥時(shí)不可注液氮,,殘留水分結(jié)冰會(huì)損傷凍存管。
- 不可省略塵埃粒子檢測(cè),,肉眼不可見的
0.3μm 顆??赡芏氯麅龃婀芡笟饪住?/li>
- 鋁合金內(nèi)膽罐:禁用含氯離子清潔劑(如氯化鈉溶液),,防止點(diǎn)蝕(腐蝕速率>0.1mm
/ 年),。
- 不銹鋼
316L 內(nèi)膽罐:清洗后需用 20% 硝酸溶液浸泡 30 分鐘進(jìn)行鈍化處理,增強(qiáng)抗腐蝕性。
查閱《產(chǎn)品使用手冊(cè)》中
“首次使用準(zhǔn)備” 章節(jié),,部分進(jìn)口品牌要求生物級(jí)罐體必須用 USP 級(jí)純化水清洗,真空層接觸水分需立即用氮?dú)獯祾撸ㄩg隔<10 分鐘),。
- 內(nèi)壁生銹:輕度銹斑(直徑<2mm)用
0.5% 檸檬酸溶液擦拭后沖洗,;重度銹蝕(面積>5cm2)需聯(lián)系廠家更換內(nèi)膽(銹蝕會(huì)導(dǎo)致液氮純度下降 10ppm 以上)。
- 包裝破損污染:若運(yùn)輸中包裝進(jìn)水
/ 進(jìn)塵,,需增加臭氧滅菌(濃度 0.3mg/m3,,作用 4 小時(shí))。
- 目視檢查:用
500L 強(qiáng)光手電照射,,30cm 距離內(nèi)無可見顆粒、油漬,、水痕,。
- 水分殘留:用濕度試紙檢測(cè),內(nèi)壁干燥無冷凝(藍(lán)色試紙不變色),。
- 塵埃粒子:激光計(jì)數(shù)器連續(xù)
3 次檢測(cè),,≥0.5μm 粒子均值<10000 個(gè) /m3。
- 微生物殘留:ATP
熒光檢測(cè)儀檢測(cè) 3 個(gè)點(diǎn),,數(shù)值均<100RLU,。
新買液氮罐的清洗需根據(jù)用途決定:
用于生物醫(yī)療或高純場(chǎng)景時(shí),,必須執(zhí)行滅菌級(jí)清洗(分初洗,、化學(xué)清洗,、純化水精洗三階段),,并通過潔凈度檢測(cè)。
- 普通工業(yè)場(chǎng)景可簡(jiǎn)化清潔,,重點(diǎn)吹掃或擦拭頸管區(qū)域,。
首次清洗后需建立《設(shè)備清洗日志》,記錄清洗時(shí)間,、試劑及檢測(cè)結(jié)果,,建議每
6 個(gè)月重復(fù)全面清洗一次。