怎么在液氮罐里儲存細胞呢?凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力,,所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作:
自增壓液氮罐
1,、預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;
2,、用胰酶對細胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);
3,、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細胞,,將預冷的凍存液加入消化完全的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻,。
4,、在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期,。
5,、凍存步驟的細致直接關系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,,放入液氮罐最好;或者可以在4℃;
自增壓液氮罐