冷凍治療過程中，組織和細胞經(jīng)歷凍結(jié),、融化等過程是導(dǎo)致其損傷的關(guān)鍵因素,。

　　1、冷凍降溫時的作用

　　緩慢降溫時,，低溫損傷源于“溶液效應(yīng)”(即高溶液/溶質(zhì)濃度下,，細胞嚴重脫水);快速降溫時，低溫損傷源于致命的細胞內(nèi)冰晶形成,。一些細胞存在冷凍保存的最佳冷卻速率,，證明了這一假說的合理性。

　　2,、冷凍后復(fù)溫作用

　　快速復(fù)溫,，組織在較高溫度的情況下，處于高濃度的電解質(zhì)中,，易于破壞;緩慢復(fù)溫,，可使組織在真正溶解前(常在-10℃～0℃)再次形成冰晶，由此形成大冰晶破壞細胞膜,。

　　3,、細胞膜損傷

　　低溫使構(gòu)成細胞膜的主要成分脂質(zhì)-蛋白復(fù)合物變性，致使細胞破裂,。

　　4、溫度休克

　　低溫引起的局部溫度突然下降致使細胞發(fā)生低溫性休克,，引起細胞死亡,。

　　5、血管性因素

　　冷凍引起血管痙攣,，毛細血管內(nèi)皮發(fā)生改變,，血小板微血拴形成，血液有形成分破壞并形成凝塊,。此外,，在冷凍作用下，毛細血管通透性增加,，從而引起血粘度增加,，靜水壓改變，血流緩慢,。冷凍區(qū)周圍動靜脈分流開放,，也可造成血流減少，導(dǎo)致組織缺血缺氧性壞死,。故有學者認為血管性因素所致微循環(huán)障礙是冷凍后組織壞死的主要原因,。

　　6、臨界細胞容積學說

　　認為在冷凍區(qū)進展中，細胞水分喪失,，細胞皺縮,，只能耐受到最小容積。超過此極限,，細胞就破壞,，從而造成組織損傷。

　　7,、凋亡 在冷凍的分子生物學研究過程中發(fā)現(xiàn)冷凍的邊緣區(qū)部分細胞有凋亡小體,，部分細胞呈現(xiàn)凋亡過程。

　　二,、液氮容器冷凍方法

　　1,、液氮淺低溫冷凍：通過對細胞和組織無明顯損傷作用使局部皮膚治療溫度控制在-1℃～6℃之間，從而產(chǎn)生某些生物學效應(yīng)以達到治療目的冷凍方法,。液氮淺低溫冷凍作用機制：

　　(1)血管性因素：由于較弱的冷刺激,，局部血管先保護性收縮，復(fù)溫后毛細血管反射性擴張,，溫度升高,，促進了血管的新生和改善了血管的舒縮功能;

　　(2)神經(jīng)系統(tǒng)因素：由于局部冷刺激，可通過神經(jīng)傳導(dǎo),，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能;同時,，又通過反射作用于植物神經(jīng)，也調(diào)節(jié)了皮膚血管的收縮功能;

　　(3)表皮增生,。

　　2,、液氮深低溫冷凍：通過對細胞和組織產(chǎn)生損傷或壞死作用以達到治療目的的冷凍方法。自增壓液氮罐