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怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢,?

時(shí)間:2020-05-26 10:32來(lái)源: 作者:班德液氮罐 點(diǎn)擊:
怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來(lái)講,,凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,,所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作,,以下 整理的資料,,僅供參考,。

1,、預(yù)先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,,4℃冰箱保存預(yù)冷;氣相液氮罐

2,、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);

3,、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,,用滴管輕輕吹打混勻,。

4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱和凍存日期,。

5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,,放入液氮罐)**;或者可以在4℃,2h;

再總結(jié)一句,,一般細(xì)胞在-80℃存放半年左右,,在液氮里可以放置更長(zhǎng)時(shí)間。氣相液氮罐
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